Кроме непосредственно идентификации выделение культуры микроба позволяет определить спектр антибактериальных препаратов, способных губительно воздействовать на него. Данная особенность стала особенно актуальной в последнее время из-за широкого применения антибиотиков и выработки микроорганизмами защитных механизмов, позволяющих им выживать в условиях применения многих антибактериальных препаратов.
Питательные среды могут быть различными по составу и консистенции. Различают жидкие, твердые и полужидкие питательные среды. Для каждого конкретного микроорганизма являются оптимальными условия определенных питательных сред. В некоторые среды преднамеренно добавляются вещества, угнетающие рост нежелательной микрофлоры, способной вытеснить колонии непосредственно возбудителя, такие среды называют селективными.
Аудитория риска
Обычно посев мокроты с последующей идентификацией возбудителя и определением антибиотикочувствительности выполняется при тяжело и длительно протекающих заболеваниях бронхолегочной системы, требующих назначения антибактериальных препаратов, а также в случае неэффективности приема антибиотиков.
Подготовка и проведение исследования
Мокрота для анализа на посев собирается утром до еды, после тщательного полоскания ротовой полости и освобождения носовых ходов и глотки от слизи. Заранее подготавливается специальная стерильная емкость с крышкой. В мокроте не должно быть примесей слизи из носоглотки и слюны. Больной выполняет глубокий вдох ртом, после чего делает продолжительное откашливание. При необходимости данные действия повторяются.
Собранная мокрота доставляется в микробиологическую лабораторию. Из мокроты приготавливается мазок, который лаборантом окрашивается одним из существующих методов. Далее проводится микроскопия, делается первичное заключение о типе возбудителя. После этого специальной петлей выполняется нанесение патологического материала на питательную среду (посев). Питательная среда и условия инкубирования (температура, продолжительность, наличие кислорода и т.д.) выбираются в каждом отдельном случае индивидуально в зависимости от предполагаемого возбудителя.
Питательная среда, на которую был посеян материал, помещается в термостат. После того, как на ней вырастают колонии микроорганизмов, производится оценка внешнего вида колоний, производится повторная микроскопия. С целью идентификации могут использоваться дополнительные методы исследования, такие как определение биохимических свойств микроорганизмов.
Для определения чувствительности к антибиотикам предложено несколько методов. Наиболее распространен дисковый метод. Для его проведения выделенный возбудитель наносится на твердую питательную среду, после чего туда же пинцетом поочередно укладываются в определенном порядке диски, содержащие различные антибиотики. Между дисками сохраняется интервал. Далее среда инкубируется в термостате в течение суток, после чего оценивается интенсивность роста. Вокруг дисков с эффективными антибиотиками формируются зоны отсутствия роста.
Вместо дисков могут использоваться тест-полоски, на которых антибиотик нанесен в виде градиента концентрации со специальной шкалой. По уровню отсутствия роста культуры можно судить о минимально эффективной дозе антибиотика. Метод разведения предполагает добавление различных концентраций антибиотика в серию пробирок с культурой микроорганизма.
Как делается
Исследование мокроты больного с посевом и определением чувствительности к антибиотикам включает следующие последовательные методы:
- первичная микроскопия мазка с предварительной идентификацией типа возбудителя;
- посев на питательную среду;
- инкубация культур в определенных условиях;
- идентификация колоний, повторная микроскопия;
- определение свойств микроорганизмов;
- определение антибактериальной чувствительности диффузионно-дисковым методом, с помощью тест-полосок или путем разведений.
Как читать результаты
Показатели
Показатель | Результат | Интерпретация |
---|---|---|
Количество КОЕ (колониеобразующих единиц) | Количество первичных очагов роста в результате посева | Определяет количественную сторону обсемененности исследуемого материала |
Чувствительность к определенному антибиотику | Чувствительны (+) | Антибиотик может приниматься в обычной дозе |
Умеренно чувствительны (+/-) | Антибиотик эффективен только в максимальной дозе | |
Резистентны / не чувствительны (-) | Антибиотик неэффективен |