Анализ мокроты (на посев с определением чувствительности к антибиотикам)

Культуральный метод исследования при исследовании мокроты заключается в выполнении посева патологического материала на искусственную питательную среду с последующей инкубацией. В результате инкубации на питательной среде через некоторое время вырастают чистые культуры микроорганизмов, которые представлены одним видом возбудителя. После выделения чистой культуры становится возможным проведение подробной идентификации микроорганизма по многим параметрам: по виду колоний, характеру роста, микроскопическим признакам, биохимическим и другим свойствам.

 

Кроме непосредственно идентификации выделение культуры микроба позволяет определить спектр антибактериальных препаратов, способных губительно воздействовать на него. Данная особенность стала особенно актуальной в последнее время из-за широкого применения антибиотиков и выработки микроорганизмами защитных механизмов, позволяющих им выживать в условиях применения многих антибактериальных препаратов.

 

Питательные среды могут быть различными по составу и консистенции. Различают жидкие, твердые и полужидкие питательные среды. Для каждого конкретного микроорганизма являются оптимальными условия определенных питательных сред. В некоторые среды преднамеренно добавляются вещества, угнетающие рост нежелательной микрофлоры, способной вытеснить колонии непосредственно возбудителя, такие среды называют селективными.

 

Аудитория риска

 

Аудитория риска

 

Обычно посев мокроты с последующей идентификацией возбудителя и определением антибиотикочувствительности выполняется при тяжело и длительно протекающих заболеваниях бронхолегочной системы, требующих назначения антибактериальных препаратов, а также в случае неэффективности приема антибиотиков.

 

Подготовка и проведение исследования

 

Подготовка и проведение исследования

 

Мокрота для анализа на посев собирается утром до еды, после тщательного полоскания ротовой полости и освобождения носовых ходов и глотки от слизи. Заранее подготавливается специальная стерильная емкость с крышкой. В мокроте не должно быть примесей слизи из носоглотки и слюны. Больной выполняет глубокий вдох ртом, после чего делает продолжительное откашливание. При необходимости данные действия повторяются.

 

Собранная мокрота доставляется в микробиологическую лабораторию. Из мокроты приготавливается мазок, который лаборантом окрашивается одним из существующих методов. Далее проводится микроскопия, делается первичное заключение о типе возбудителя. После этого специальной петлей выполняется нанесение патологического материала на питательную среду (посев). Питательная среда и условия инкубирования (температура, продолжительность, наличие кислорода и т.д.) выбираются в каждом отдельном случае индивидуально в зависимости от предполагаемого возбудителя.

 

Питательная среда, на которую был посеян материал, помещается в термостат. После того, как на ней вырастают колонии микроорганизмов, производится оценка внешнего вида колоний, производится повторная микроскопия. С целью идентификации могут использоваться дополнительные методы исследования, такие как определение биохимических свойств микроорганизмов.

 

Для определения чувствительности к антибиотикам предложено несколько методов. Наиболее распространен дисковый метод. Для его проведения выделенный возбудитель наносится на твердую питательную среду, после чего туда же пинцетом поочередно укладываются в определенном порядке диски, содержащие различные антибиотики. Между дисками сохраняется интервал. Далее среда инкубируется в термостате в течение суток, после чего оценивается интенсивность роста. Вокруг дисков с эффективными антибиотиками формируются зоны отсутствия роста.

 

Вместо дисков могут использоваться тест-полоски, на которых антибиотик нанесен в виде градиента концентрации со специальной шкалой. По уровню отсутствия роста культуры можно судить о минимально эффективной дозе антибиотика. Метод разведения предполагает добавление различных концентраций антибиотика в серию пробирок с культурой микроорганизма.

Как делается

Исследование мокроты больного с посевом и определением чувствительности к антибиотикам включает следующие последовательные методы:

 

  • первичная микроскопия мазка с предварительной идентификацией типа возбудителя;
  • посев на питательную среду;
  • инкубация культур в определенных условиях;
  • идентификация колоний, повторная микроскопия;
  • определение свойств микроорганизмов;
  • определение антибактериальной чувствительности диффузионно-дисковым методом, с помощью тест-полосок или путем разведений.

Как читать результаты

Показатели

 

Показатель Результат Интерпретация
Количество КОЕ (колониеобразующих единиц) Количество первичных очагов роста в результате посева Определяет количественную сторону обсемененности исследуемого материала
Чувствительность к определенному антибиотику Чувствительны (+) Антибиотик может приниматься в обычной дозе
Умеренно чувствительны (+/-) Антибиотик эффективен только в максимальной дозе
Резистентны / не чувствительны (-) Антибиотик неэффективен

 

Оставить ответ

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

6 − 4 =